347 vlekvrye staal chemiese samestelling Die grootte van veneuse of kapillêre bloed, spesifiek vir SARS-CoV-2, T-selreaksies bepaal immuniteit teen COVID-19.

Dankie dat jy Nature.com besoek het.Jy gebruik 'n blaaierweergawe met beperkte CSS-ondersteuning.Vir die beste ervaring, beveel ons aan dat jy 'n opgedateerde blaaier gebruik (of versoenbaarheidsmodus in Internet Explorer deaktiveer).Daarbenewens, om deurlopende ondersteuning te verseker, wys ons die webwerf sonder style en JavaScript.
Sliders wat drie artikels per skyfie wys.Gebruik die terug- en volgende-knoppies om deur die skyfies te beweeg, of die skyfiebeheerknoppies aan die einde om deur elke skyfie te beweeg.

347 vlekvrye staal chemiese samestelling

Vlekvrye staal 347 spoelbuis chemiese samestelling

Die chemiese samestelling en meganiese eienskappe van die vlekvrye staal 347 spoelbuis is soos volg:
- Koolstof – 0,030% maksimum
- Chroom – 17-19%
- Nikkel – 8-10,5%
- Mangaan – 1% maksimum

Vlekvrye staal 347 spoelbuis meganiese eienskappe

Volgens die vervaardiger van die vlekvrye staal 347 spoelbuis, meganiese eienskappe van 347 spoelbuis:
- Treksterkte (psi) – 75 000 min
- Opbrengssterkte (psi) – 30 000 min
- Verlenging (% in 2″) – 25% min
- Brinell-hardheid (BHN) – 170 maks

Toepassings en gebruike van vlekvrye staal 347 spoelbuis

• Vlekvrye staal 347 spoelbuis wat in suikermeulens gebruik word.
• Vlekvrye staal 347 spoelbuis gebruik in kunsmis.
• Vlekvrye staal 347 spoelbuis wat in die industrie gebruik word.
• Vlekvrye staal 347-spoelbuis wat in kragsentrales gebruik word.
• Vlekvrye staal 347-spoelbuis wat in voedsel en suiwel gebruik word.
• Vlekvrye staal 347 spoelbuis wat in olie- en gasaanleg gebruik word.
• Vlekvrye staal 347 spoelbuisvervaardiger wat in die skeepsboubedryf gebruik word.

Daar word vermoed dat SARS-CoV-2-spesifieke T-selle teen infeksie en vordering van COVID-19 beskerm, maar daar is geen direkte bewyse hiervoor nie.Hier het ons volbloedmetings van SARS-CoV-2-spesifieke interferon-γ positiewe T-selle vergelyk met positiewe COVID-19 diagnostiese toetsresultate (PCR en/of laterale vloei) binne 6 maande na Lian se bloedversameling.Onder 148 deelnemers wat veneuse bloedmonsters geskenk het, was die omvang van SARS-CoV-2-spesifieke T-selreaksie aansienlik hoër in diegene wat beskerm gebly het as in diegene wat besmet was (P <0.0001).% risiko van infeksie, terwyl hoë intensiteit hierdie risiko tot 5,4% verminder het.Hierdie resultate is veralgemeen na 'n bykomende 299 deelnemers wat 'n skaalbare kapillêre bloedtoets getoets het wat toegang tot populasieskaal T-sel-immuniteitsdata kon fasiliteer (14,9% vs. 4,4%).Dus kan die meting van T-selle spesifiek vir SARS-CoV-2 die risiko van infeksie voorspel en moet geëvalueer word wanneer individuele en bevolkings immuunstatus gemonitor word.
Om die immuunrespons op SARS-CoV-2-infeksie te meet en te verstaan, is belangrik om doeltreffende toekomstige strategieë te ontwikkel om die openbare gesondheid en ekonomiese impak van toekomstige COVID-19-uitbrake te verminder.Identifikasie van immuunkorrelate sal belangrike inligting verskaf oor 'n bevolking se vatbaarheid vir virusinfeksie, moontlik vroeë waarskuwing van piekhospitalisasies, en ook mense toelaat om hul risiko van infeksie en die risiko om ander te besmet persoonlik te bestuur.Immuuntoesig het van kritieke belang geblyk om die doeltreffendheid van COVID-19-entstowwe by gesonde en hoërisiko-pasiënte1,2,3 te evalueer, veral in SARS-CoV-24-mutante, en die opsporing van immuunonderdrukte sal die behoefte beteken om immuniteit 'n hupstoot te gee. Word ingeënt en voorkom toekomstige uitbrake.
'n Individu se vlak van immuniteit teen SARS-CoV-2-infeksie hang af van veelvuldige faktore: virale lading ten tye van blootstelling, virusvariante, ouderdom, vorige inenting/infeksiestatus, comorbiditeite, medikasie, en die belangrikste, anti-SARS-CoV-infeksie .2 aanpasbare immuunrespons vind plaas ten tye van blootstelling aan die virus5.Evaluering van die immuunrespons op SARS-CoV-2-infeksie en/of inenting het gefokus op serologiese toetse wat die teenwoordigheid van teenliggaampies spesifiek vir 'n strukturele proteïen (bv. spykerglikoproteïen) meet.Die teenwoordigheid of afwesigheid van teenliggaampies alleen bepaal egter nie 'n beskermende immuunrespons akkuraat nie, aangesien reaksies mettertyd aansienlik verswak word6 en neutralisering van SARS-CoV-2-variante by herstellende of dubbel-geënte individue Swak aktiwiteit, wat kan lei tot 'n groot aantal deurbraak infeksies7.Inderdaad, beskerming teen simptomatiese COVID-19 wat deur die Omicron-variant (B.1.1.529) veroorsaak word, het tot ongeveer 10% afgeneem na slegs 4–6 maande van mRNA-inenting, alhoewel beskerming teen ernstige siektes vir ten minste 7 maande lank >68% voortduur8.Die meting van aanpasbare geheue T-selreaksies, wat langtermynbeskerming teen virusinfeksie verleen, is die beste aanduiding van vatbaarheid vir SARS-CoV-2-infeksie, en dus 'n beter aanduiding van die risiko om positief te toets vir COVID-199, aangesien spesifieke T selle kan infeksie voorkom.sonder seroomskakeling10,11.Die meting van T-selreaksies het egter minder aandag gekry as gevolg van metodologiese probleme en logistieke probleme met die verkryging en vervoer van veneuse bloedmonsters, veral wanneer groot waarnemingstudies uitgevoer word om entstofdoeltreffendheid te bepaal en immuniteit te monitor.Ingeënte individue toon egter sterk T-selaktiwiteit teen SARS-CoV-2-variante, wat moontlik die verlies aan teenliggaamreaktiwiteit vergoed om die erns van COVID-1912,13 te beperk.
Hier het ons probeer verstaan ​​of 'n enkele meting van SARS-CoV-2 T-selreaksie die absolute risiko van SARS-CoV-2-infeksie binne 6 maande na bloedmonsterneming kan voorspel, ongeag vorige immuun-beïnvloedende faktore.Ten einde die T-seltoets hoë deurset te maak en van toepassing op groter studies, het ons ook probeer om die toets geminiaturiseer te maak sodat dit met behulp van 'n kapillêre vingerstokbloedmonster uitgevoer kan word.
Ons het sellulêre en humorale immuunresponse by gesonde skenkers gemeet deur 'n gekombineerde opsporing van SARS-CoV-2 T-selle en IgG-teenliggaampies gebaseer op volveneuse bloed (vir deelnemerseienskappe, sien Maart 2022 14. By ingeënte skenkers, SARS-CoV-2- spesifieke T-sellulêre response is bepaal deur plasma interferon-γ (IFN-γ) vlakke te meet na volbloedstimulasie met SARS-CoV-2 peptied (soos voorheen, verwysings 14,15,16,17,18) en IgG response wat geassosieer word met nukleokapsied (N) was verhoog in diegene wat 'n vorige infeksie gerapporteer het, alhoewel beide reaksies hoër was in voorheen besmette, ongeënte skenkers, maksimaal in die liggaam (Fig. 1a, b). was die hoogste in voorheen geïnfekteerde ingeënte skenkers (Figuur 1c–e).
'n SARS-CoV-2-spesifieke IFN-γ+ T-selreaksies is gemeet deur veneuse volbloedtoets en gebaseer op deelnemers se inentings en vorige SARS-CoV-2-infeksiestatus (bevestig deur PCR en/of laterale vloeitoets)' Vac + /Inf +' n = 60 (groen), 'Vac + /Inf-' n = 82 (blou), 'Vac-/Inf +' n = 4 (geel), 'Vac-/Inf-' n = 1 (nie toegepas nie).SARS-CoV-2-spesifieke IgG-bindingsreaksies teiken nukleokapsied (“N”) (b; ****P < 0.0001, **P = 0.0016), gepunte reseptor-bindende domein (“RBD”) (c; ** P = 0,0022, *P < 0,015), pieksubeenheid 1 ("S1") (d; ***P = 0,0005, *(Vac + /Inf+ vs. Vac + /Inf-) P = 0,022, *(Vac- /Inf+ vs. Vac+/Inf-) P = 0,012) en piek subeenheid 2 (“S2”) (e) is gemeet deur veneuse volbloedtoetse en gebaseer op deelnemer-inenting en vorige SARS -CoV-2 (bevestig deur PCR en/ of laterale vloeitoets) aansteeklike status.'Vac + /Inf +' n = 60 (groen), 'Vac + /Inf-' n = 71-82 (blou), 'Vac-/Inf +' n = 4 (geel).Vergelykings is gemaak met behulp van die Kruskal-Wallis-toets, aangepas vir veelvuldige vergelykings deur die Dunn-toets te gebruik.Die data word vertoon as kaarte (middellyn by mediaan, boonste limiet by 75ste persentiel, onderste limiet by 25ste persentiel) met snorbaarde by die minimum en maksimum waardes.Elke kolletjie verteenwoordig 'n skenker.Rou data word verskaf in die vorm van rou data lêers.
Na bloedmonsters is deelnemers gevra om self positiewe PCR en/of laterale vloeitoetsresultate vir COVID-19 te rapporteer;indien deelnemers positief getoets het tussen 1 September 2021 en 29 Desember 2021, was hulle vermoedelik besmet met Delta (B.1.617.2) variant koronavirus en Omicron (B.1.1.529) na Openbare Gesondheid Wallis na 29 Desember 2021, toe hierdie opsie van kommer word dominant.Onder 148 evalueerbare skenkers het ons 'n infeksiekoers van 26,3% (39/148) binne 6 maande na bloedskenking waargeneem, van wie 38 'n tweede of derde dosis van die COVID-19-entstof ontvang het (die infeksie-deurbraak het plaasgevind ná Pfizer/BioNTech ( BNT162b2) mRNA-entstof of AstraZeneca-entstof (ChAdOx1 nCoV-19));'n ongeënte skenker is ook besmet.Die omvang van SARS-CoV-2-spesifieke IFN-γ-positiewe T-selreaksies was aansienlik laer in diegene wat 'n positiewe diagnostiese toets vir COVID-19 gerapporteer het as by onbesmette skenkers (P < 0,0001; Fig. 2a), hoofsaaklik as gevolg van optimale induksie van T-selreaksies deur inenting by sommige deelnemers (P = 0,050; Aanvullende Fig. 1).Daar was geen korrelasie tussen die grootte van die IFN-γ+ T-selreaksie en die tyd tot 'n positiewe COVID-19-toetsresultaat nie (Aanvullende Figuur 2).Daarteenoor was nóg RBD-, S1-, S2-bindende IgG-reaksies (Figure 2b-d) nóg RBD-, S1-neutraliserende teenliggaampe-reaksies spesifiek vir wildtipe of delta SARS-CoV-2 (B.1.617).) (Aanvullende Fig. 3) kan onderskei tussen mense met 'n risiko van infeksie.Lae N-gekoppelde IgG-reaksies teen SARS-CoV-2 het egter gekorreleer met die risiko van COVID-19-infeksie (P = 0,0084; Figuur 2e);diegene wat positief getoets het, was 85% minder waarskynlik (P = 0.00035; OF 0.15, 95).% CI: 0,047–0,39 (Aanvullende Figuur 4).
Veneuse bloedmonsters van gesonde skenkers (n = 148) het SARS-CoV-2-spesifieke IFN-γ+ T-selreaksies (a; ****P < 0.0001) en binding van die Spike-reseptor aan die spesifieke SARS-CoV beoordeel -2 stimulus.domein (“RBD”) (b), piek 1 subeenheid (“S1″) (c), piek 2 subeenheid (“S2″) (d), en nukleokapsied (“N”) (e; **P = 0.0084) .Deelnemers wat positief getoets het vir COVID-19 (PCR en/of laterale vloei) het geïdentifiseer;alle infeksies het binne 6 maande na bloedmonster geneem.Vergelykings is gemaak met behulp van 'n tweestert Mann-Whitney toets.Die data word vertoon as kaarte (middellyn by mediaan, boonste limiet by 75ste persentiel, onderste limiet by 25ste persentiel) met snorbaarde by die minimum en maksimum waardes.Elke kolletjie verteenwoordig 'n skenker.ns is nie belangrik nie.Die hittekaart f toon Spearman se rangkorrelasies tussen veranderlikes vir die gespesifiseerde datastel.Vergelykings wat nie statisties betekenisvol was nie, is uit die matriks uitgesluit en met leë selle gemerk.Rou data word verskaf in die vorm van rou data lêers.
Die voorafbepaalde diagnostiese positiewe afsnypunt van 14 is as te arbitrêr beskou om die risiko van herinfeksie te bepaal, so interkwartielreekse is vasgestel om absolute risikoparameters vas te stel.Die statistiese model, wat slegs veranderlikes ingesluit het wat 'n betekenisvolle uitwerking op die resultate gehad het, het getoon dat die grootte van die SARS-CoV-2-spesifieke IFN-γ+ T-selreaksie die belangrikste immuun biomerker was vir die bepaling van 'n individu se kanse om te wees getoets vir COVID.-19 positief (Figuur 2f en Aanvullende Figuur 4).Pasiënte met 'n SARS-CoV-2-spesifieke IFN-γ+ T-selreaksie in die derde (194-489 pg/ml IFN-γ) en vierde (>489 pg/ml IFN-γ) kwartiele 65% (P = 0.055; OF 0.35, 95% CI: 0.11–1.00) en 90% (P = 0.0050; OF 0.098, 95% CI: 0.014–0.42) het meer deelnemers gehad.Die kanse is skraal (Aanvullende Fig. 4).Algehele, deelnemers met 'n SARS-CoV-2-spesifieke T-selreaksie vanaf veneuse bloed ≤79 pg/ml IFN-γ het 'n 43.2% risiko van deurbraakinfeksie op 6 maande gehad, in vergelyking met 'n respons >489 pg/ml.ml IFN-γ het 'n risiko van infeksie van 5.4% gehad (tabel 2).
Veneuse volbloedtoetse is beperk in omvang as gevolg van die behoefte aan monsterversameling deur die flebotomist.Om die beskikbaarheid van T-sel- en IgG-toetse vir SARS-CoV-2 te verhoog, is 'n alternatiewe metode vir kapillêre bloedmonsters ontwikkel om deelnemers in staat te stel om vingerstokbloedmonsters by die huis te kry.Sover ons kennis strek, was daar geen vorige verslae oor die meting van antigeenspesifieke T-selfunksie in kapillêre bloedmonsters nie.'n Sterk korrelasie is voorheen getoon tussen limfosiettellings wat verkry is met behulp van vergelykbare kapillêre en veneuse bloedmonsters.Daarbenewens is daar gerapporteer dat volbloed-gebaseerde toetse wat SARS-CoV-2-spesifieke T-selreaksies meet slegs 320 μL veneuse bloed gebruik,20 wat kommer oor die frekwensie van stamvader T-selle in kapillêre bloedmonsters uitskakel.
Ons het hierdie hoë-deurset gestandaardiseerde samewerkende toets van SARS-CoV-2 T-selle en IgG-teenliggaampies gebaseer op kapillêre volbloed gebruik om sellulêre en humorale immuunrespons te meet by deelnemers met verskeie comorbiditeite en vorige inenting/infeksiestatus (Tabel 1).gewerf van regoor die VK tussen 24 Januarie en 14 Maart 202214. Die meerderheid (90.9%) vingermonsters is korrek verkry en binne 24 uur na versameling na die laboratorium gestuur.In sommige gevalle is monsters binne 48 uur na bloedtrekking ontvang, maar nie een van hierdie monsters het kwaliteitkontrole geslaag nie en het nie algehele T-sel- of teenliggaammetings beïnvloed nie (Aanvullende Fig. 5).Alhoewel daar verskille was in die grootte van die SARS-CoV-2-spesifieke IFN-γ+ T-selrespons gemeet in onderskeie kapillêre en veneuse bloedmonsters in sommige individue, was daar geen beduidende verskille in die algemeen nie (P = 0,88; Aanvullende Fig. 6 ).).
SARS-CoV-2-spesifieke IFN-γ+ T-selreaksies was aansienlik verhoog in ingeënt individue wat ook 'n vorige infeksie gerapporteer het (P = 0.0001), maar nie betekenisvol hoër as in voorheen geïnfekteerde ongeënte skenker individue nie (P = 0.19, Fig. 3a).).IgG-reaksies teen piek-glikoproteïen (RBD, S1, S2) was aansienlik hoër by ingeënte skenkers as by ongeënte skenkers, ongeag die vorige infeksiestatus (Figuur 3b-d).Interessant genoeg was die gemiddelde N-gebonde IgG-reaksie die hoogste in voorheen besmette, ongeënte deelnemers in vergelyking met ingeënte deelnemers, hoewel dit nie betekenis gekry het nie (Figuur 3e).Onder ongeënte en onbesmette skenkers wat self verklaar het, was 15 van 37 (40.5%) deelnemers positief vir N-gekoppelde IgG, bo die voorheen vasgestelde drempel van 2.0 BAU/mL14;hierdie 15 deelnemers Twaalf van hierdie pasiënte het positief getoets vir IFN-γ+ T-selreaksie bo die voorheen vasgestelde drempel van 22.7 pg/mL IFN-γ14.Daarom is dit waarskynlik dat hierdie deelnemers voorheen met SARS-CoV-2 besmet was en nie vir COVID-19 getoets is nie weens persoonlike keuse, gebrek aan PCR en/of laterale vloeitoerusting, of asimptomaties was.Alhoewel daar 'n beduidende korrelasie was tussen T-selreaksies op IFN-γ+ en N-gekoppelde IgG-vlakke in ongeënte skenkers (P = 0,0044; Aanvullende Figuur, het N-gekoppelde IgG-reaksie vinniger afgeneem as N-gekoppelde IgG-reaksie, terwyl IFN-γ + T-selreaksies is gehandhaaf ongeag inentingstatus, alhoewel die aantal skenkers 50 weke na-uitdaging laag was (Aanvullende Fig. 8). Die tipe inenting was oor die algemeen min verskil in waargenome IgG-reaksies spesifiek vir SARS-CoV- 2, T selle en RBD-geassosieerde, hoewel deelnemers wat twee dosisse BNT162b2 gevolg deur mRNA1273 herinenting ontvang het, aansienlik hoër vlakke van IFN-γ + T-selle meer sensitief was vir SARS-CoV-2 as diegene wat twee dosisse ChAdOx1 en BNT162b2 ontvang het (Aanvullende Fig. 9) Daarbenewens het gerapporteerde comorbiditeite min algehele verskil in waargenome T-selreaksies in vergelyking met gesonde skenkers gehad (Aanvullende Fig. 10).
'n SARS-CoV-2-spesifieke IFN-γ+ T-selreaksies is gemeet deur volbloedkapillêre toets en was gebaseer op deelnemers se inentings en vorige SARS-CoV-2 aansteeklike status (bevestig deur PCR en/of laterale vloeitoets).'Vac + /Inf +' n = 42 (groen), 'Vac + /Inf-' n = 158 (blou), 'Vac-/Inf +' n = 33 (geel), 'Vac- /Inf-' n = 37 (grys).****P < 0,0001, ***P = 0,0001, *(Vac+/Inf- vs. Vac-/Inf-) P = 0,045, *(Vac-/Inf+ vs. Vac- /Inf-) P = 0,014 .SARS-CoV-2-spesifieke IgG-bindingsreaksies op die piekreseptor-bindingsdomein (“RBD”) (b; ****P < 0,0001, ns: nie betekenisvol), pieksubeenheid 1 (“S1”) (c; * * **P < 0,0001, ns: nie betekenisvol nie), pieksubeenheid 2 (“S2″) (d; ****P < 0,0001, ***P = 0,0005, *P = 0,016) en nukleokapsied (“N”) (e; ****P < 0.0001, ns nie betekenisvol nie) is gemeet met behulp van veneuse volbloedanalise en gebaseer op deelnemers se inentings en vorige SARS-CoV-2 (bevestig deur PCR en/of laterale vloei-analise) Infeksies is onderverdeel deur status.'Vac + /Inf +' n = 46 (groen), 'Vac + /Inf-' n = 182 (blou), 'Vac-/Inf +' n = 34 (geel), 'Vac-/Inf-' n = 37 (grys).Vergelykings is gemaak met behulp van die Kruskal-Wallis-toets, aangepas vir veelvuldige vergelykings deur die Dunn-toets te gebruik.Die data word vertoon as kaarte (middellyn by mediaan, boonste limiet by 75ste persentiel, onderste limiet by 25ste persentiel) met snorbaarde by die minimum en maksimum waardes.Elke kolletjie verteenwoordig 'n skenker.Rou data word verskaf in die vorm van rou data lêers.
Soos voorheen, is deelnemers gevra om positiewe PCR en/of laterale bloedvloeiresultate vir COVID-19 aan te meld;volgens die Britse Gesondheidsagentskap is daar vermoed dat deelnemers met die Omicron-koronavirus (B.1.1.529) besmet was ten tyde van die toets van die positiewe virusvariant, aangesien dit die dominante variant in die VK gedurende die studietydperk was.Onder 299 evalueerbare skenkers het ons 'n infeksiekoers van 8.0% (24/299) binne drie maande van kapillêre skenking waargeneem, waarvan sewe nie ingeënt is nie.Die proporsie comorbiditeite onder alle deelnemers was laer in diegene wat positief getoets het vir COVID-19 (10,7%) as diegene wat negatief getoets het vir COVID-19 (24,4%, Tabel 1), wat moontlik te wyte is aan die feit dat deelnemers met sekere siektes is versigtiger en beskerm teen moontlike gevolge soos diabetes en kanker.Soos waargeneem in 'n veneuse bloed-kohort, SARS-CoV-2-spesifieke interferon-γ (IFN-γ)-positiewe T-selle gemeet in kapillêre bloedmonsters van individue wat 'n positiewe diagnostiese toets vir COVID-19 rapporteer.Die responsgrootte was betekenisvol laer as by onbesmette skenkers (P = 0.034; Figuur 4a) as gevolg van die relatief swak induksie van 'n T-selrespons deur inenting en/of vorige infeksie (Aanvullende Figuur 11).Net so was nóg RBD-, S1-, S2-bindende IgG-reaksies (Figure 4b-d) nóg RBD-, S1-neutraliserende teenliggaampe-reaksies spesifiek vir wildtipe of delta SARS-CoV-2 (B. 1.617).(Aanvullende figuur 12).Individue met enige beduidende risiko van infeksie kan geïdentifiseer word.In teenstelling met die veneuse kohort, onderskei N-verwante IgG-reaksies ook nie COVID-19-risiko nie (Figuur 4e), wat daarop dui dat die Omicron-variant (B.1.1.529) immuunontduiking in voorheen besmette individue verhoog, soos onlangs beskryf 21. In teenstelling hiermee was die sterkte van die SARS-CoV-2-spesifieke IFN-γ T-selreaksie weer die belangrikste veranderlike in die bepaling van individuele kans om positief te toets vir COVID-19 (Figuur 4f).Algehele, deelnemers met 'n SARS-CoV-2-spesifieke kapillêre T-sel reaksie ≤23.7 pg/ml IFN-γ het 'n 14.9% risiko van infeksie op drie maande gehad in vergelyking met 'n respons >141.6 pg/ml.ml IFN.-γ het 'n risiko van infeksie van 4.4% gehad (Tabel 2).
IFN-γ+ T-selreaksies spesifiek vir SARS-CoV-2 (a; *P = 0.034) en SARS-CoV-2 spesifieke IgG-geteikende reseptor-bindende domein (“RBD”) (b), piek subeenheid 1 (' S1′) (c), pieksubeenheid 2 ('S2') (d) en nukleokapsiedbindingsreaksie ('N') (e).Deelnemers wat as positief vir COVID-19-toetse (PCR en/of laterale bloedvloeitoets) geïdentifiseer is, het alle infeksies binne 3 maande na bloedmonster geneem.Vergelykings is gemaak met behulp van 'n tweestert Mann-Whitney toets.Die data word vertoon as kaarte (middellyn by mediaan, boonste limiet by 75ste persentiel, onderste limiet by 25ste persentiel) met snorbaarde by die minimum en maksimum waardes.Elke kolletjie verteenwoordig 'n skenker.ns is nie belangrik nie.Die hittekaart f toon Spearman se rangkorrelasies tussen veranderlikes vir die gespesifiseerde datastel.Vergelykings wat nie statisties betekenisvol was nie, is uit die matriks uitgesluit en met leë selle gemerk.Rou data word verskaf in die vorm van rou data lêers.
Soos ons na die volgende fase van die COVID-19-pandemie beweeg, sal die fokus verskuif van voorkoming na individuele risikobestuur en die identifisering van kwesbare lede van die samelewing.Die vestiging van korrelate van immuniteit teen COVID-19 is van kritieke belang om hierdie hoërisikogroepe effektief te identifiseer en te behandel.Daar is nou toenemende bewyse dat T-sel-immuniteit teen SARS-CoV-2-infeksie beskerm en die erns van COVID-1910 beperk.Die data wat hier aangebied word, toon dat die gekombineerde sterkte van SARS-CoV-2-spesifieke IFN-γ+ T-selreaksies teen piek-, membraan- en nukleokapsied-strukturele proteïene groter beskerming teen COVID-19 verleen as wat teenliggaambinding 19 bevorder of neutraliseer. .en moet in ag geneem word wanneer individuele en/of kudde-immuniteit geassesseer word.RNA-virusse soos SARS-CoV-2 of influensa A-virus (IAV) vermy serologiese neutralisasie deur vinnig ontblote B-sel-epitope op oppervlakantigeene wat deur teenliggaampies herken word, te ontwikkel.Die beskermende immuunrespons wat deur T-selle verskaf word, kan die teiken van epitope van meer bewaarde streke van virale proteïene weerspieël wat nie vinnig 'n immuunrespons kan ontsnap nie.T-sel-gemedieerde beskerming teen nuwe SARS-CoV-2-variante is soortgelyk aan die heterosubtipiese beskerming bemiddel deur T-sel-teikening van bewaarde intrinsieke proteïene wat in IAV22,23-subtipes gesien word.
Ten spyte van die enorme potensiaal om die sellulêre immuunrespons op COVID-19 te meet, is relatief min aandag geskenk aan die ontwikkeling van akkurate, hoë-deurset, gestandaardiseerde T-seltoetse.Die tradisionele kompleksiteite en koste verbonde aan die meting van T-selreaksies verhinder die akkurate bepaling van T-selimmuniteit wanneer gekeur word vir groot populasie immuniteit.Terwyl verskeie kommersiële volbloedpeptiedstimulasietoetse onlangs beskikbaar geword het, benodig almal tans 'n flebotoom om bloed te verkry, wat beskikbaarheid en skaal beperk.Kapillêre bloedstelsels word wyd gebruik om die voorkoms van SARS-CoV-2-teenliggaampies in 'n populasie te bepaal.Ons het kapillêre bloedtoetse aangepas om volbloedpeptiedstimulasietoetse uit te voer om T-selreaktiwiteit teen SARS-CoV-2 strukturele proteïene en SARS-CoV-2-spesifieke teenliggaamreaksies te bepaal.Trouens, die gekombineerde meting van SARS-CoV-2-spesifieke teenliggaampies en T-selle in dieselfde kapillêre bloedmonster is baie aantreklik: (i) verminder die behoefte aan veelvuldige bloedtoetse per deelnemer, (ii) verbeter deelnemer se ervaring en begrip;(iii) verbeter logistiek en verminder duplisering, (iv) verminder omgewingsimpak aangesien minder laboratoriumverbruiksgoedere en monsteraflewering vereis word.Alhoewel algehele IFN-γ reaktiwiteit soortgelyk was tussen ooreenstemmende veneuse en kapillêre bloedmonsters, is waargeneem dat dit laer was in die kapillêre bloedkohort van deelnemers (Fig. 4a) in vergelyking met die veneuse bloedkohort (Fig. 2a).IFN-γ-waardes Daar is verskeie verklarings vir hierdie bevinding, naamlik, 'n groot aantal deelnemers met comorbiditeite wat immuunonderdrukkende terapie benodig, is gewerf in die kapillêre bloedmonsterkohort (Tabel 1) en lewensvatbaarheid en/of funksie van T-selle verkry vanaf vaskulêre monsters kan laag wees, veral met inagneming van die toestande van langtermynberging van monsters voor peptiedstimulasie.
Die tans wyd beskikbare COVID-19-entstof bied die beste beskerming teen ernstige siektes vir die meeste ontvangers binne 6 maande na inenting8.Bemoedigend, ten spyte van die swak entstof-geïnduseerde serologiese neutralisasie van SARS-CoV-26,7-variante, het T-selreaksies wat deur inenting teen wilde-tipe SARS-CoV-2 ontlok is, hoogs reaktief gebly, aangesien 25 ander na vore gekom het.Die data wat ons hier aanbied, demonstreer die belangrikheid van 'n breër assessering van entstof-immunogenisiteit, en beklemtoon entstowwe met onvoldoende T-sel-immuniteit om skielike infeksie en aanhoudende oordrag van die virus te voorkom.Ons het ook waargeneem dat baie ongeënte individue wat in die kapillêre kohort gewerf is, 'n beduidende reaksie van SARS-CoV-2-spesifieke T-selle (en N-bindende IgG) gehad het, ongeag vorige inenting, wat waarskynlik te wyte is aan vorige infeksie.Eerder as om toepaslike individue in te ent, moet hul risiko van infeksie beoordeel word op grond van hul huidige immuniseringstatus en die ingeligte keuses wat gemaak word.
Beperkings van hierdie studie sluit in die versekering dat deelnemers self infeksie met SARS-CoV-2 aangemeld het na bloedversameling om die relevansie van immuniteit te bepaal;sommige deelnemers kan asimptomatiese infeksie hê en kan nie PCR en/of laterale vloeitoetse vir COVID-19 ondergaan nie.Ons datastel het ook nie inligting oor deelnemers se medikasie ten tyde van bloedmonsters gehad nie.Daarbenewens, aangesien al ons deelnemers slegs ligte/matige simptome of geen simptome gerapporteer het nie, was dit nie moontlik om immuunreaksies uit ons datastel te identifiseer wat 'n verhoogde risiko van ernstige siekte en hospitalisasie vir COVID-19 voorspel het nie.Die teenwoordigheid van CD8+ T-selreaksies teen nukleokapsied-spesifieke epitope is egter onlangs geassosieer met beskerming teen ernstige COVID-1926.Boonop het die toets wat hier gebruik word, nie T-selreaksies gemeet op spesifieke vroeë uitgedrukte SARS-CoV-2 nie-strukturele proteïene wat onlangs getoon het dat dit verkieslik ophoop in seronegatiewe gesondheidsorgwerkers wat in kontak was met besmette pasiënte.Op grond van hierdie werk, gegewe die voorkoms van gemeenskapsoordrag ten tye van werwing en die hoë waarskynlikheid van kontakbesmetting in die bevolking, blyk die aantal SARS-CoV-2-spesifieke T-selle wat in ons toetse gevind is, ook in staat te wees om op te ruim.subkliniese infeksies in ons kohorte.Ten slotte het ons nie interleukien 2-produksie deur T-selle gemeet nie, want ons vorige werk het swak identifikasie van SARS-CoV-214-spesifieke T-sel-reaksies getoon, hoewel IL-2-spesifieke response voorafbestaande kruisreaktiwiteit kan aandui.selle wat verband hou met verdediging teen SARS-CoV-211-infeksie.
Saamgevat beklemtoon hierdie data die fundamentele behoefte aan langtermyn longitudinale studies wat SARS-CoV-2-spesifieke T-selreaksies insluit in maatstawwe van bevolkingskaal-immuniteit.Hierdie pogings kan aangehelp word deur die ontwikkeling van 'n nuwe kapillêre bloedtoets wat T-sel reaksie meet.
Die navorsingsprojek het deelnemers van Februarie 2021 tot Maart 2022 gewerf. Die groep gesonde skenkers (n = 148) wat veneuse bloedmonsters geskenk het, het hoofsaaklik bestaan ​​uit universiteitspersoneel en studente wat aan Cardiff Universiteit se COVID-19-siftingsdiens deelneem of personeel by 'n laerskool in Cardiff.Alle deelnemers was andersins gesond en het geen immuunonderdrukkende middels geneem nie (sien Tabel 1 vir eienskappe).Die groep deelnemers wat kapillêre bloedmonsters geskenk het, het alle vrywillige skenkers (ouderdom 18+) van regoor die VK ingesluit.Tussen 24 Januarie en 14 Maart 2022 is 342 deelnemers by die studie ingeskryf, van wie 299 bloedmonsters by die laboratorium ingedien het.Baie deelnemers het ongeënt gebly en/of ernstige comorbiditeite gerapporteer, insluitend outo-immuun siektes en kanker (sien Tabel 1 vir kenmerke).Hierdie studie het etiese goedkeuring ontvang van die Newcastle en North Tyneside 2 Navorsingsetiekkomitee (ID IRAS: 294246) en die Cardiff University School of Medicine Navorsingsetiekkomitee (SREC ref: SMREC 21/01).Alle deelnemers het skriftelike ingeligte toestemming gegee voor insluiting.Deelnemers het geen vergoeding ontvang vir deelname aan hierdie studie nie.
Veneuse bloedmonsters is verkry deur venepunksie in 6 of 10 ml litium of natrium heparien vacutainers (BD).Kapillêre bloedmonsters is met 'n vingerlanset verkry en dan in heparien-mikrohouers (BD) versamel.'n Minimum van 400 µl bloed word benodig;enige monster minder as hierdie bedrag sal afgekeur word.Ander redes vir monsterverwerping sluit massiewe stolling en/of hemolise in en versuim om viskose plasma vir analise te versamel (Aanvullende Fig. 5).'n Totaal van 299 kapillêre bloedmonsters was beskikbaar vir die assessering van teenliggaamresponse, waarvan 270 monsters ook beskikbaar was vir die assessering van T-selresponse.
SARS-CoV-2-spesifieke T-selreaksies is geassesseer met behulp van die COVID-19 Immuno-T-toets (ImmunoServ Ltd) en uitgevoer soos voorheen beskryf14.Kortliks, een 6 ml of 10 ml natriumheparien (BD) veneuse vacutainer is van elke deelnemer geneem en binne 12 uur na bloedversameling in die laboratorium verwerk.Alhoewel die meeste monsters binne 24 uur verwerk is, is een 400–600 μl gehepariniseerde mikrobloeding (BD) kapillêre bloed binne 48 uur van vingerstokmonster geneem.Veneuse en/of kapillêre bloedmonsters is gestimuleer met aparte peptiedpoele spesifiek vir SARS-CoV-2 (wildtipe variant) soos voorheen beskryf14.Hierdie peptiedbiblioteek bevat 420 15-meer volgordes met 11 oorvleuelende aminosure wat oor die hele piekproteïen (S1 en S2) (S; NCBI proteïen: QHD43416 1), nukleokapsied fosfoproteïen (NP; NCBI proteïen: QHD43423 2) en membraan proteïen (Mglikoproteïen) strek. ; NCBI-proteïen: QHD43419 1) koderende volgordes (na verwys as "S-/NP-/M-kombinatoriese peptiedbiblioteek").Alle peptiede is tot >70% gesuiwer, in steriele water opgelos en teen 'n finale konsentrasie van 0.5 μg/ml per peptied gebruik.Monsters is vir 20-24 uur by 37°C geïnkubeer.Die buise is dan vir 3 minute by 5000×g gesentrifugeer en ~150 µl plasma is vanaf die bokant van elke bloedmonster versamel.Stoor plasmamonsters by -20°C vir tot een maand voordat sitokien/teenliggaam-opsporingstoetse uitgevoer word.
IFN-γ is gemeet met behulp van die IFN-γ ELISA MAX Deluxe Set (BioLegend, katalogusnommer 430116) en uitgevoer volgens die vervaardiger se instruksies.Onmiddellik nadat stopoplossing (2N H2SO4) bygevoeg is, is die mikroplaat by 450 nm gelees met behulp van 'n BioLegend Mini ELISA plaatleser.IFN-γ is gekwantifiseer deur standaardkromme-ekstrapolasie met behulp van GraphPad Prism.Waardes onder die onderste opsporingslimiet van die toets is aangeteken as 7.8 pg/ml, waardes bo die boonste opsporingslimiet van die toets is aangeteken as 1000 pg/ml.
Anti-SARS-CoV-2 RBD/S1/S2/N IgG-teenliggaampies is gemeet met behulp van 'n Bio-Plex Pro Human IgG SARS-CoV-2 4-pleks paneel (Bio-Rad, kat.nr. 12014634) en gemerk volgens vervaardiger se instruksies.instruksies.Monsters wat waardes bo die kwantifiseringsgrens rapporteer, is herontleed teen 'n 1:1000 verdunning.Die gemiddelde fluoressensie intensiteit van die krale is gemeet op 'n Bio-Plex 200 instrument (Bio-Rad).Teenliggaamkonsentrasies is bereken deur die VIROTROL SARS-CoV-2 enkelkontroletoets (Bio-Rad) en omgeskakel na WHO/NIBSC 20/136 Internasionale Verwysing Standaard Eenhede (BAU/ml) deur gebruik te maak van die vervaardiger se kalibrasiefaktor.
RBD- en S1-subeenheid-spesifieke neutraliserende teenliggaampies teen SARS-CoV-2-wildtipe en delta (B.1.617) SARS-CoV-2-lyne is gemeet met die Bio-Plex Pro Human SARS-CoV-2 Variant Neutralization Antibody Kit (Bio) -Rad , deelnr. 12016897), volgens die vervaardiger se instruksies.Meet die gemiddelde fluoressensie-intensiteit op die Bio-Plex 200 (Bio-Rad) en bereken die persentasie inhibisie (dws neutralisasie) deur die volgende formule te gebruik:
Aansteeklike neutralisasietoetse vir SARS-CoV-2 is uitgevoer soos voorheen beskryf28.Kortliks, 600 PFU van wilde-tipe SARS-CoV-2 is geïnkubeer met 3-voudige reeksverdunnings van plasma in duplikaat vir 1 uur by 37°C.Die mengsel is dan vir 48 uur by VeroE6-selle gevoeg.Monolae is met 4% paraformaldehied gefixeer, gepermeabiliseer met 0.5% NP-40 en vir 1 uur in blokkeerbuffer geïnkubeer (PBS wat 0.1% tussen en 3% afgeroomde melk bevat).Primêre teenliggaampies (anti-nukleokapsied 1C7, Stratech) is vir 1 uur by kamertemperatuur by die blokkeerbuffer gevoeg.Na was, is 'n sekondêre teenliggaam (anti-muis IgG-HRP, Pierce) vir 1 uur by blokkeerbuffer gevoeg.Eenlae is gewas, ontwikkel met Sigmafast OPD en gelees op 'n Clariostar Omega plaatleser.Putte sonder virus, sonder virus maar sonder teenliggaampies, en genormaliseerde sera wat intermediêre aktiwiteit toon, is in elke eksperiment as kontroles ingesluit.
Statistiese analise is uitgevoer in GraphPad Prism (weergawe 9.4.1).Die normaliteit van die datastel is getoets met behulp van die Shapiro-Wilk-toets.Nie-parametriese kriteria is vir alle vergelykings gebruik.Die Mann-Whitney-toets is gebruik vir ongepaarde monsters.Alle toetse was tweesydig met 'n nominale betekenisdrempel van P ≤ 0.05.
Die aanvanklike verkennende analise van die datastel is in R (weergawe 4.0.3) gedoen.Dit sluit die ontwikkeling van Spearman se eenveranderlike rangkorrelasiematriks in, waar die korrelasie tussen twee veranderlikes deur die grootte en kleur van die vierkante verteenwoordig word.Statistiese betekenisvolheid tussen assosiasies is bereken met Spearman se rho, waar waardes ≤0.05 as beduidend beskou is.Vergelykings wat nie statisties betekenisvol was nie, is uit die matriks uitgesluit en met leë selle gemerk.P-waardes is aangepas vir veelvuldige vergelykings met behulp van Holm se regstelling.’n Binêre logistiese regressiemodel is gebruik om die effek van veranderlikes in die datastel op positiewe reaksie op COVID-19 te simuleer.IFN-γ T-selreaksies en anti-RBD/S1/S2/N IgG titer tellings is omgeskakel in faktore, waar elke individu aan die toepaslike kwartiel vir elke telling toegeken is.Daarna is 'n aanvanklike navorsingsmodel ontwikkel met behulp van die glm-funksie in die statistiese pakket (V4.0.3).Die kansverhoudings wat van hierdie oorspronklike model afgelei is, is uit die koëffisiënte van die model onttrek deur die 'odds_plot'-funksie in die OddsPlotty-pakket (V1.0.2) te gebruik.Toe ons die kruisvalideringsmodel ontwikkel het, het ons die "bestglm"-funksie van die bestglm-pakket (V0.37.3) gebruik om gebruikersvooroordeel te beperk en te verseker dat die beste subset voorspellers gekies kan word.Die metode wat gekies is was "uitputtend" en die inligtingskriterium wat gebruik is om modelpassing te assesseer, was AIC.Dieselfde werkvloei wat hierbo beskryf is, is gebruik om die kansverhouding te verkry.
Vir meer inligting oor studie-ontwerp, sien die Nature study abstract gekoppel aan hierdie artikel.
Briewe en versoeke vir materiaal moet aan dr. Martin Scarr of professor Andrew Godkin gerig word.Hierdie artikel verskaf die oorspronklike data.
Die R-kode wat gebruik word om statistiese modelle te skep, is publiek beskikbaar sonder versoek29.Herdrukinligting en lisensies kan gevind word by www.nature.com/reprints.
Munro, APS et al.Veiligheid en immunogenisiteit van sewe COVID-19-entstowwe as 'n derde dosis (versterker) na twee dosisse ChAdOx1 nCov-19 of BNT162b2 (COV-BOOST) in die Verenigde Koninkryk: 'n fase 2, verblind, multisentrum, gerandomiseerde, beheerde proef.Lancet 398, 2258–2276 (2021).
Stewart, ASV et al.Immunogenisiteit, veiligheid en reaktogenisiteit van heteroloë primêre inenting teen COVID-19 (Com-COV2) deur gebruik te maak van mRNA, virale vektore en proteïen byvoegingsentstowwe in die Verenigde Koninkryk: 'n fase 2, enkelblinde, gerandomiseerde proef, nie-minderwaardigheidstoets.Lancet 399, 36–49 (2022).
Lee, ARIB et al.Doeltreffendheid van COVID-19-entstowwe by immuunonderdrukte pasiënte: 'n sistematiese oorsig en meta-analise.BMJ 376, e068632 (2022).
Dejnirattisai, W. et al.Verminderde neutralisasie van SARS-CoV-2 mikron variant B.1.1.529 deur serum na immunisering.Lancet 399, 234–236 (2022).
Lipsich M, Krammer F, Regev-Yohai G, Lustig Y, en Baliser RD Deurbraakinfeksie in SARS-CoV-2 ingeënt individue: meting, oorsake en gevolge.Nasionale Priester van Immunologie.https://doi.org/10.1038/s41577-021-00662-4 (2021).
Levin, EG et al.Verswakte immuun humorale reaksie op BNT162b2 Covid-19 entstof vir 6 maande.N. eng.J. Geneeskunde.385, e84 (2021).
Carreño, JM et al.Aktiwiteit van herstel- en entstofsera teen SARS-CoV-2 Omicron.Nature 602, 682–688 (2022).
Chemaitelly, H. et al.Duur van beskerming van die Qatari mRNA-entstof teen SARS-CoV-2 Omicron BA.1 en BA.2 subvariante.medrxiv https://doi.org/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022).
Tai, MZ et al.Geheue B-selfrekwensie neem af met deurbraakinfeksie van COVID-19 delta-entstof.Molekulêre Geneeskunde EMBO.14, e15227 (2022).
Kundu, R. et al.Kruisreaktiewe geheue T-selle word geassosieer met die beskerming van COVID-19-kontakte teen SARS-CoV-2-infeksie.Nasionale gemeente.13, 80 (2022).
Geurtsvan Kessel, CH et al.Kenmerkende SARS CoV-2 omikron-reaktiewe T-sel- en B-selreaksies in COVID-19-entstofontvangers.die wetenskap.Immunologie.https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo2202 (2022).
Gao, Yu et al.Oorgeërfde SARS-CoV-2-spesifieke T-selle herken Omicron-variante.Nasionale medisyne.28, 472–476 (2022).
Scarr, MJ et al.Meting van SARS-CoV-2-spesifieke T-selle van volbloed openbaar asimptomatiese infeksie en immunogenisiteit van entstof by gesonde individue en pasiënte met vaste orgaankanker Immunologie https://doi.org/10.1111/imm.13433 (2021).
Tan, AT et al.Vinnige meting van SARS-CoV-2 piek T-selle in volbloed van ingeënte en natuurlik besmette individue.J. Klinies.belê.https://doi.org/10.1172/JCI152379 (2021).
Tallantyre, EU et al.COVID-19-entstofreaksie by pasiënte met veelvuldige sklerose.installeer.Neurone.91, 89–100 (2022).
Bradley RE et al.Aanhoudende COVID-19-infeksie met Wiskott-Aldrich-sindroom het verdwyn na terapeutiese inenting: 'n gevalleverslag.J. Klinies.Immunologie.42, 32–35 (2022).